当前位置 > 细胞复苏细胞复苏步骤和注意事项
-
细胞复苏的步骤
真核细胞通常悬浮在带有血清和冷冻剂的培养基内,保存在-196°C 的液氮中。如果是商业订购的,通常储存在用干冰包裹的冻存管中。所以冻存后的细胞必须快速解冻后立即培养,以获得最大的生存能力,为了除去冻存时的添加剂, 24 小时后要更换培养基。 一、材料 培养基, 37’C 预...
2024-08-27 网络 更多内容 353 ℃ 586 -
细胞复苏一般多久会贴壁
经过37度水浴1分钟之内解冻细胞冻存液进行复苏.你冻存的时候是不是消化的时间过长,这是一般人所注意不到的,即使书上也不讲这个问题,但我因为这个问题就两种肺癌细胞和一种肝癌细胞专门做过试验,这个绝对是绝大部分人细胞复不活的一个原因。太长的消化时间会让细胞复苏时失...
2024-08-27 网络 更多内容 248 ℃ 943 -
复苏的细胞为什么不贴壁
刚复苏的细胞有时所需时间长且贴壁不牢。细胞冷冻后复苏时,都有不同程度的肿胀,若以50ml培养瓶待细胞长满瓶底的70%～80%时消化冻存。特别是培养表面上的电荷密度影响较大。血清中的冷析蛋白和纤维粘连蛋白可在培养表面与细胞间架桥,有利于加快细胞贴附速率。细胞在培养...
2024-08-27 网络 更多内容 678 ℃ 149 -
复苏的细胞为什么不贴壁
齐氏生物认为复苏细胞是否贴壁跟你冻存时的操作有直接关系。而且细胞的传代数越多,即细胞越老,越禁不起低温的折腾。复苏后,细胞有个休眠期,大约714天不等。只要不死,你就慢慢养着。突破了某个时间点,你会发现细胞又神奇的康复了。但要等到细胞状态良好,传2代以上再做实验...
2024-08-27 网络 更多内容 884 ℃ 928 -
caco2细胞复苏后
哇,Caco2细胞没有养过。但是作为一个贴壁类型的细胞,24小时不贴壁很不正常啊。。。十之八九,没有贴的死光光了哦。。。节哀顺便。。。如果真的是死了,问题可能出在:冷冻的过程温度不对,冻得太快了?化得太慢了?冷冻液成分不对?血清给得不够?化出来离心过没有?离心太快也可...
2024-08-27 网络 更多内容 764 ℃ 363 -
细胞复苏一般要几天?
细胞复苏过程: 1、细胞解冻:从细胞保存处取出放入37˚C水浴中快速震摇12min,即可解冻。 2、细胞复苏:解冻后的细胞液在1000rpm,常温条件下离心5min,弃去上清液,加入适当体积的该类细胞需要的完全培养液,置37˚C、5%CO2条件下培养。如果加入的完全培养液的量可...
2024-08-27 网络 更多内容 137 ℃ 477 -
细胞复苏时候一定要离心吗
细胞复苏时候一定要离心,否则会造成实验失败。细胞复苏,生物学的一种术语,是指将冻存在液氮或者70℃冰箱中的细胞解冻之后重新培养,细胞恢复生长的过程。细胞(英文名:cell)并没有统一的定义,比较普遍的提法是:细胞是生物体基本的结构和功能单位。已知除病毒之外的所有生物均由...
2024-08-27 网络 更多内容 917 ℃ 272 -
复苏的细胞为什么不贴壁
齐氏生物认为复苏细胞是否贴壁跟你冻存时的操作有直接关系。而且细胞的传代数越多,即细胞越老,越禁不起低温的折腾。复苏后,细胞有个休眠期,大约714天不等。只要不死,你就慢慢养着。突破了某个时间点,你会发现细胞又神奇的康复了。但要等到细胞状态良好,传2代以上再做实验...
2024-08-27 网络 更多内容 495 ℃ 341 -
A549细胞的复苏方法?
1.先从液氮罐内迅速拿出需要复苏的细胞,迅速放入37摄氏度的水浴中,并不停的摇晃,注意瓶口不要碰到水面,以防污染细胞; 2.将盛入37摄氏度水浴中的细胞连同烧杯一起带入细胞房,待细胞均匀融化后,拿出; 3.将细胞悬液倒入离心管,加入3-4滴完全培养基,放入离心机中离心1500转(调两档...
2024-08-27 网络 更多内容 379 ℃ 932 -
细胞复苏后实验的问题
博凌科为解答:复苏后的细胞并不生长分裂,可能是培养条件不够合适。。。不分裂的细胞内部生命活动不太活跃,在进行病毒或质粒转染,应该也不会有多大的克隆扩增吧。。。这样对于后面所要进行的筛选或鉴定是不利的
2024-08-27 网络 更多内容 475 ℃ 85
- 新的内容